關(guān)于酶標(biāo)儀
發(fā)布日期：2022/9/7 17:55:13
酶標(biāo)儀（Microplate Reader）是對酶聯(lián)檢測（EIA）實驗結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)反應(yīng)是通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。
光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號。電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。
微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測，因此省去了X，Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。其常見規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對其可進(jìn)行一孔一孔的檢測或一排一排的檢測。
酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得，也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源燈發(fā)出的光經(jīng)聚光鏡，光柵后到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液，然后再經(jīng)濾光片送到光電管。
酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型，單通道又分為自動型和手動型兩種。其中，自動型的儀器設(shè)有X和Y兩個方向的驅(qū)動機(jī)構(gòu)，在機(jī)械裝置的驅(qū)動下，微孔板上的小孔一個個依次進(jìn)入光束下面測試。手動型靠手移動微孔板來進(jìn)行測量。
在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上，又發(fā)展了多通道、全自動型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀一般都是自動型的，它設(shè)有多個光束和多個光電檢測器。如8通道的儀器，設(shè)有8條光束（或8個光源）、8個檢測器和8個放大器。在機(jī)械驅(qū)動裝置的作用下，樣品被8個一排、8個一排檢測。多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快，但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，價格也較貴，多用于大中型醫(yī)院。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)檢測試劑盒的應(yīng)用，使得酶標(biāo)儀在繁殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛，同時促進(jìn)了繁殖健康技術(shù)水平提高。目前在國內(nèi)血站臨床試驗室中酶標(biāo)儀成為ELISA測定的重要工具。在農(nóng)業(yè)中利用酶標(biāo)儀研究酚氧化酶，為開發(fā)以該酶為靶標(biāo)的新型害蟲控制劑提供理論依據(jù)。伏馬菌素是最近發(fā)現(xiàn)的一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒素代謝產(chǎn)物，該毒素已被世界衛(wèi)生組織列為近年來首先進(jìn)行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標(biāo)儀對微孔板進(jìn)行光學(xué)測量，可以檢測伏馬菌素的含量，在食品安全方面有著重要的應(yīng)用。生長曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI?；蛘呔淇倲?shù)的對數(shù)log CFU/ml。隨時間變化曲線，可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規(guī)律。目前通過分光光度計測定菌懸液時存在即時性差、操作繁瑣、易污染等缺點，由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器，所以我們總會選擇使用酶標(biāo)儀來進(jìn)行菌懸液OD值的測定，來提高工作效率，節(jié)約時間。
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